| NMT作为生命科学底层核心技术，是建立活体创新科研平台的必备技术。2005年~2020年，NMT已扎根中国15年。2020年，中国NMT销往瑞士苏黎世大学，正式打开欧洲市场。 |
基本信息
主题： NKCC2（离子转运体）参与胃酸分泌的实时生理证据
期刊：European Journal of Pharmacology
影响因子：3.17
研究使用平台：NMT活体组织创新科研平台
标题：Na+-K+-2Cl- cotransporter 2 located in the human and murine gastric mucosa is involved in secretagogue-induced gastric acid secretion and is downregulated in lipopolysaccharide-treated mice
作者：首都医科大学朱进霞、郑丽飞
检测离子/分子指标
H+
检测样品
小鼠胃黏膜活体组织
中文摘要（谷歌机翻）
离子/分子流实验处理方法
10 μM布美他尼、100 μM组胺、300 μM西咪替丁分别处理小鼠胃黏
离子/分子流实验结果
图1B所示的折线图是使用NMT技术监测小鼠胃黏膜H+流速变化的结果。加入组胺（100 μM）引起H+流速增加，从0.52±0.02增加到0.74±0.03 pmol cm-2 s-1，这被组胺H2受体拮抗剂西咪替丁（300 μM）抑制（图1C）。布美他尼（10 μM）预处理可明显抑制组胺诱导的H+流速，但对基础H+流速无影响，表明NKCC在促酸分泌中起作用。
图1 不同处理下小鼠胃黏膜H+流速的变化情况
其他实验结果
双重染色免疫荧光结果表明，NKCC1的免疫反应性（IR）主要出现在表达H+/K+-ATPase的细胞的基底外侧膜，NKCC2 IR在小鼠和人胃粘膜中H+/K+-ATPase阳性细胞的顶端侧最为突出。在培养的大鼠胃壁细胞中也观察到NKCC2 IR。NKCC2信号也作为阳性对照在小鼠和大鼠肾脏中进行研究，发现在肾小管的顶端观察到强烈的NKCC2 IR。
在静息条件下，布美他尼在腔管或浆膜的处理均未显著抑制胃酸分泌。这些结果表明，抑制顶端膜上高表达的NKCC2，可以显著抑制促分泌素诱导的胃酸分泌。
NKCC2基因敲除可降低forskolin刺激的胃酸分泌。
组胺刺激NKCC2在胃粘膜和培养壁细胞中的易位。
脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）处理的小鼠中NKCC2和VAMP2表达降低。
结论
离子流实验使用的测试液
141.8 mM NaCl, 5.9 mM KCl, 1.2 mM MgCl2, 10 mM HEPES acid, 5.6 mM Tris, 2.56 mM CaCl2, 2 g glucose, pH 7.4