储存条件：常温保存，保质期1年。

产品说明：

本产品通过玻璃珠破碎或者液氮研磨菌体等物理方法，辅以强效的化学裂解液高效裂解真菌细胞壁，无需蜗牛酶等破壁酶长时间酶解细胞壁过程。单组样品提取可在30 min 内完成。提取的DNA没有蛋白质以及盐离子污染，可直接用于酶切，PCR等后续实验。

操作步骤：

（一）菌体收集

1. 菌液集菌：取 3-5 mL 过夜培养的菌液（OD600 一般在 1 以上）到离心管中，12,000 rpm 离心 2 min 弃上清留菌体沉淀（1.5mL离心管需离心3-4次收集菌体）。 

2. 菌落集菌：用接种针或枪头在培养基上刮取尽可能多的菌落，转移到装有 1 mL 无菌水的离心管中，洗下接种针或枪头上的菌体。12,000 rpm 离心 2 min 弃上清留菌体沉淀。

3. 洗涤菌体：在菌体沉淀中加入无菌水1 mL重悬菌体， 12,000rpm 离心 2 min 弃上清留菌体沉淀。

（二）菌体裂解：

1. 玻璃珠破碎：在菌体沉淀中加入500 μL裂解液I 和 0.5 g 的玻璃珠，常温涡旋震荡10 min 。 

注：此步也可液氮研磨：将菌体沉淀放入研钵中，加入液氮研磨成粉后转移到新的离心管中，再加入500 μL裂解液I，常温涡旋震荡 3 分钟。

2.在含裂解产物的离心管中加入500 μL裂解液II，涡旋震荡 3 min，12,000 rpm 离心 2 min，将分层后的上清液全部转移到一个5 mL 的离心管中。

注意：下层为浅黄色有机蛋白相（玻璃珠在管底），上层为澄清或者乳白色水相，水相含基因组DNA，小心吸取，避免触及有机相。

（三）基因组DNA收集：

1. 在步骤（二）所得的上清中加入3倍体积的结合液III，颠倒数次混匀后，分三次上DNA吸附柱，每次上柱后均先室温放置2 min，然后12,000 rpm 离心1 min，倒掉穿透液。

2. 在吸附柱中央加入500 μL洗涤液，12,000 rpm离心1 min，弃穿透液。

3. 再将吸附柱12,000 rpm离心30 s以甩干乙醇。

4. 将吸附柱放入一个1.5 mL离心管中。在吸附柱中央加入50 μL洗脱液（65-70℃预热），室温静置2 min。12,000 rpm离心2 min。将穿透液重新加入吸附柱中央，12,000 rpm离心1 min以洗脱更多基因组DNA。

5. 检测DNA质量。将所得的基因组DNA保存于-20ºC冰箱。

注意事项：

1.如需大量提取，可以增加样品处理量，具体操作可咨询本公司。