退化神经元检测试剂盒
产品名称: 退化神经元检测试剂盒
英文名称:
产品编号: G3262-3*50ml
产品价格: 0
产品产地: 中国 北京索莱宝
品牌商标: solarbio
更新时间: 2024-11-21T13:59:51
使用范围: null
- 联系人 : 索莱宝-龚思雨
- 地址 : 北京市通州区中关村科技园区通州园金桥科技产业基地景盛南四街15号85A三层
- 邮编 : 101102
- 所在区域 : 北京
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退化神经元检测试剂盒
货号:G3262
规格:3×10mL/3×50mL
保存:2-8℃,避光,有效期6个月
产品组成:
名称 |
3×10mL |
3×50mL |
保存 |
|
试剂(A):预处理液A(10×) |
10mL |
50mL |
室温,避光 |
|
临用前取适当体积试剂A用90%乙醇稀释10倍后使用,稀释的工作液可冷藏保存48h,建议现配现用。 |
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试剂(B):预处理液B(10×) |
10mL |
50mL |
室温,避光 |
|
临用前取适当体积试剂B用蒸馏水稀释10倍后使用,稀释的工作液可冷藏保存48h,建议现配现用。 |
||||
试剂(C):工作液 |
试剂(C1):储备液(10×) |
1mL |
5mL |
2-8℃,避光 |
试剂(C2):稀释液 |
9mL |
45mL |
2-8℃,避光 |
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临用前取出试剂C1、C2复温至室温(25~30℃)后按照1:9的比例配制成工作液C,建议在4h内使用。 |
产品说明:
神经元变性的原因和影响是神经科学家们的主要关注点,目前已有多种检测神经元变性的方法,包括镀银染色和FJC染色方法。FJC 染色是近年来新兴的一种神经元荧光染色技术,不仅避免了常规镀银染色的繁琐和高成本,而且可以与其它荧光素标记物结合进行多重荧光染色。相较于其他染料,Fluoro-Jade C具有更高的信号背景比,以及更高的分辨率。这使其不仅可以定位神经细胞体的退化,还可以定位远端树突,轴突和末端。而且该染料具有高度抗褪色性,几乎与所有组织学处理和染色方案兼容。
退化神经元检测试剂盒(FJC法)可对退化神经元特异染色,本染色试剂盒提供成套的即用型试剂套装,可在简单稀释后,可直接用于实验,方便快捷。
自备材料:
多聚赖氨酸载玻片、染色缸、盖玻片、中性树胶、恒温箱、系列乙醇、二甲苯
操作步骤:(仅供参考)
1. 冰冻切片浸于蒸馏水复温3min,石蜡切片脱蜡至水。
2. 切片自然晾干。
3. 浸入稀释好的试剂A工作液中5min,然后转入70%乙醇2min,然后蒸馏水浸洗2min。
4. 浸入稀释好的试剂B工作液中漂白10min。
5. 蒸馏水洗2min。
6. 将配好的试剂C工作液均匀滴加在处理后的脑切片上,室温避光孵育10min。
7. 蒸馏水洗三次,每次1min。
8. 晾干、透明(二甲苯1min),中性树胶封片。
9. 在荧光显微镜下观察。(使用蓝光或者488nm激光激发,FITC通道检测)
染色结果:
退化神经元 |
绿色荧光(FJC) |
细胞核 |
蓝色荧光(DAPI) |
注意事项:
1. 该试剂盒可染色切片数量取决于单次染色容器大小。以能装5张切片的标准剥离染色缸为例,每50ml稀释好的试剂C工作液可以染色80-100张切片,滴染建议是400-600ul/张。稀释后的工作液不稳定,单次试验建议在4h内使用完毕,每次开始实验批次时,最好使用新稀释的试剂C工作液。
2. 试剂盒内试剂建议根据说明书标注保存温度分开保存,以免反复冻融对染色效果造成影响。
3. FJC为曙红类似物(着色红细胞),可能会对血管有一定染色效果,可以通过组织灌注或其他组织预处理步骤来有效避免血管染色,但可能无法完全消除。从测试结果来看,明显的形态学差异通常不会对结果判读造成影响。
4. 染色后清洗、封片、镜下观察的过程中注意避免强光照射。
5. 试剂原液或稀释液可能有少量沉淀,通常在稀释过程中会溶解,不影响染色结果。如有顾虑可用针头过滤器(水性滤膜)过滤后使用。
6. 通常建议使用正常小鼠脑切片作为阴性对照,应无明显染色。