人凝溶胶蛋白(Gelsolin)酶联免疫分析（ELISA）
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
药品名称：
通用名：人凝溶胶蛋白(Gelsolin)酶联免疫分析试剂盒
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆、或其它组织液中凝溶胶蛋白(Gelsolin)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人凝溶胶蛋白(Gelsolin)水平。用纯化的人凝溶
胶蛋白(Gelsolin)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入凝溶胶蛋
白(Gelsolin)，再与 HRP 标记的 Gelsolin 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过
彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化
成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人凝溶胶蛋白(Gelsolin)呈正相关。用酶标仪在450nm
波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人凝溶胶蛋白(Gelsolin)浓度。
试剂盒组成
1 20 倍浓缩洗涤液 50ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 标准品（720 ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 标准品稀释液 2ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张  
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1．标本采集后尽早进行实验。
2．不能检测含NaN3的样品，因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
3．可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
操作步骤
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔 10 孔，在第一、第二孔中分别加标
准品 100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二
孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，
混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔
中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各
取 50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl，混
匀后从第七、第八孔中分别取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准
品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，
浓度分别为（480 ng/L，320 ng/L ，160ng/L，80 ng/L，40ng/L）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样
品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样
品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混
匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。    
4. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8.