细胞培养是每个实验人员都会使用的技术，其准确性和可重复性对于实验结果的可靠性至关重要。然而，支原体污染作为一种常见且隐蔽的威胁，对细胞培养的影响不容忽视。
支原体是什么？
支原体是目前已知一类能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞微生物，无细胞壁，直径为0.1-0.3μm，且形态易变，极易通过除菌过滤器。大部分支原体繁殖速度比细菌慢，细胞培养过程中遇到的支原体95%都来自于以下四种支原体：口腔支原体、精氨酸支原体、猪鼻支原体、莱氏无胆甾支原体，其中莱氏无胆甾支原体为牛源性。
采用常规的显微镜无法直接观察到支原体，当细胞（特别是传代细胞）被支原体污染后，细胞内的DNA、RNA及蛋白表达发生改变，而细胞的生长率一般并未发生显著的影响，因而细胞被支原体污染一般难以察觉。因此细胞都需要定期（如每个月）进行支原体污染的检测。
支原体对细胞培养的危害：
1. 细胞生长抑制
支原体通过与细胞竞争营养资源、产生毒素或干扰细胞信号传导，显著抑制细胞的生长速率和增殖能力。这导致实验所需细胞数量不足或细胞状态不佳，影响实验的进行和结果的准确性。
2. 基因表达异常
支原体感染能诱导细胞产生氧化应激反应，影响DNA修复机制，导致基因表达模式发生变化。这种基因表达的异常会干扰对特定基因功能的研究，使得研究结果失真。
3. 蛋白质合成干扰
支原体污染可能改变细胞内蛋白质的合成与降解平衡，影响蛋白质的功能和细胞间的相互作用，进而影响实验结果的可靠性。
4. 细胞凋亡增加
支原体感染可触发细胞凋亡程序，导致细胞死亡。这不仅减少了可用于实验的活细胞数量，还可能混淆对细胞存活和凋亡机制的理解。
5. 实验结果的不可重复性
支原体污染导致的细胞生理状态变化，使得实验结果难以在不同实验室或不同时间点重复，严重阻碍了科学研究的进展。
在实验室的日常研究，为了确保科研工作顺利进行，定期检测细胞培养物是否存在支原体污染是很重要的。
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