LY2857785

MCE 国际站：LY2857785

品牌：MedChemExpress (MCE)

CAS：1619903-54-6

纯度：0.9992

货号：HY-12293

存储条件：粉末 -20°C 3 年 4°C 2 年溶剂中 -80°C 2 年 -20°C 1 年

运输条件：美国大陆的室温；其他地方可能有所不同。

产品活性：LY2857785 是一种I型可逆的 ATP 竞争性的 CDK9，CDK8 和 CDK7 抑制剂，IC50 分别为 11 nM，16 nM 和 246 nM。

体外：LY2857785 对 114 种蛋白激酶表现出良好的选择性，只有 5 种其他蛋白激酶被抑制，其效力 (IC50) 小于 0.1 μM，总共 14 种激酶的效力小于 1 μM。在细胞水平上，LY2857785 抑制 U2OS 细胞中的 CTD P-Ser2 和 CTD P-Ser5，IC50 分别为 0.089 (n=13) 和 0.042 (n=1) μM。然而，LY2857785 仅诱导中等程度的 G2-M DNA 含量增加，从 35% 增加到 55%，EC50 为 0.135 μM。LY2857785 在 MV-4-11、RPMI8226 和 L363 细胞中表现出有效的化合物暴露和时间依赖性细胞增殖抑制。孵育 4 至 24 小时后，细胞生长抑制效力在 8 小时时达到最大，对 MV-4-11、RPMI8226 和 L363 细胞的 IC50 分别为 0.04、0.2 和 0.5 μM。LY2857785 诱导的癌细胞凋亡也具有时间依赖性，在 L363 细胞中 8 小时时达到最大效力，IC50 为 0.5 μM[1]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

体内：在 HCT116 异种移植肿瘤小鼠中，LY2857785 表现出剂量依赖性 RNAP II CTD P-Ser2 抑制作用，TED50 为 4.4 mg/kg，TEC50 为 0.36 μM。在 HCT116 和 MV-4-11 裸鼠异种移植模型中，LY2857785 在 TED70（8 mg/kg）下还表现出持续时间较长的 CTD P-Ser2 抑制作用，持续时间为 3 至 6 小时。在裸鼠 MV-4-11 异种移植模型中，LY2857785 同样表现出剂量依赖性 CTD P-Ser2 抑制作用，TED70（7 mg/kg）和 TED90（10 mg/kg）下持续 8 小时。 LY2857785 在 AML MV-4-11 异种移植肿瘤模型中表现出最显著的肿瘤消退，无论是小鼠静脉推注还是大鼠静脉输注[1]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

动物实验：小鼠和大鼠[1] 对于异种移植模型，将人类癌细胞 U87MG、MV-4-11、A375 和 HCT116 植入雌性裸鼠或无胸腺裸鼠体内。动物分别接受生理盐水、雷帕霉素或 LY2857785 治疗。裸鼠体内的 MV-4-11 异种移植瘤通过静脉推注 LY2857785（4、8 和 18 mg/kg）治疗。裸鼠体内的 MV-4-11 异种移植瘤通过静脉输注 LY2857785（3、6 和 9 mg/kg）治疗，持续 4 小时。未经治疗的对照组每 3 天静脉注射一次生理盐水。使用 Beckman Coulter 的 CXP 软件进行流式细胞术分析。 LY2857785 和/或对照化合物的效果的统计学意义通过 Dunnett 方法、单因素方差分析进行评估。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

细胞实验：将实体瘤细胞接种在聚-D-赖氨酸包被的96孔板中，将血液细胞系接种在未包被的96孔板中过夜，然后用化合物（例如LY2857785）处理。将实体瘤细胞在室温下用Prefer固定20分钟，然后用PBS中的0.1％Triton X-100渗透15分钟。用抗活化的caspase-3通过免疫荧光测量caspase-3的表达。用原位细胞死亡检测试剂盒测量末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）活性。两种测定均在Acumen Explorer激光扫描荧光微孔板流式细胞仪上进行分析。用CellTiter-Glo发光细胞活力测定法[1]测定血液肿瘤细胞的细胞活力。MCE尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

激酶实验：CDK7 和 CDK9 反应混合物分别含有 10 mM Tris-HCl (pH 7.4)、10 mM HEPES、5 mM DTT、10 μM ATP、0.5 μCi 33p-ATP、10 mM MnCl2、150 mM NaCl、0.01% Triton X-100、2% DMSO、0.05 mM CDK7/9ptide 和 2 nM CDK7/Mat1/cyclin H 或 2 nM CDK9/cyclin T1。CDK8/cyclin C 反应在 HEPES 30 mM、DTT 2 mM、MgCl2 5 mM、0.015% Triton X-100、5 μM ATP 和 400 nM RBER-CHKStide（含 20 nM 酶）中进行。将 LY2857785 在 DMSO 中按 1:3 的比例连续稀释，以测定剂量反应。反应在 96 孔聚苯乙烯板中进行。反应在室温下孵育 60 分钟，然后用 10% H3PO4 或 10% 三氯乙酸 (TCA) 终止。对于滤膜结合测定，将反应转移到 96 孔滤膜中，并通过 Microbeta 闪烁计数器测量。对于 ADP Transcreener 荧光偏振测定，反应用 ADP 检测混合物猝灭，在室温下孵育 2 小时，然后在 Tecan Ultra 384 平板读数器上以 λex=610 nm、λem=670 nm 测量 FP。使用制备的 ADP/ATP 稀释系列作为标准曲线，根据毫极化 (μP) 计算 ADP 产物的浓度。激酶分析在 96 孔聚苯乙烯板中进行。简而言之，在最终体积为 25 μL 的溶液中，将酶与适当的缓冲液、肽底物和稀释的 LY2857785 一起孵育。通过添加 ATP/[33P] 来启动反应，并将 ATP 混合物在室温下孵育 40 分钟。通过添加 5 μL 3% 磷酸来淬灭反应，将 10 μL 反应物滴到滤垫上，在 75 mM 磷酸中清洗 3 次，每次 5 分钟，在甲醇中清洗 1 次。滤膜干燥后，进行闪烁计数[1]。MCE 尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考。

IC50 & Target：CDK9 0.011 μM (IC50) CDK8 0.016 μM (IC50) CDK7 0.246 μM (IC50)

参考文献：

[1]. Yin T, et al. A novel CDK9 inhibitor shows potent antitumor efficacy in preclinical hematologic tumor models. Mol Cancer Ther. 2014 Jun;13(6):1442-56. Mol Cancer Ther. 2014 Jun;13(6):1442-56.

品牌介绍:
•   MCE (MedChemExpress) 拥有200 多种全球独家化合物库，我们致力于为全球科研客户提供前沿最全的高品质小分子活性化合物；
•   50,000 多种高选择性抑制剂、激动剂涉及各热门信号通路及疾病领域；
•   产品种类涵盖各种重组蛋白，多肽，常用试剂盒，更有 PROTAC、ADC 等特色产品，广泛应用于新药研发、生命科学等科研项目；
•   提供虚拟筛选，离子通道筛选，代谢组学分析检测分析，药物筛选等专业技术服务；
•   设有专业的实验中心和严格的质控、验证体系；
•   提供 LC/MS、NMR、HPLC、手性分析、元素分析等各项质检报告，确保产品的高纯度、高品质；
•   产品的生物活性多经各国客户实验验证；
•   Nature, Cell, Science 等多种顶级期刊及制药专利收录了MCE客户的科研成果；
•   专业团队跟踪最新的制药及生命科学研究进展，为您提供全球最新的活性化合物；
•   与世界各大制药公司及知名科研机构建立了长期的合作。